<p>La Fundición de ENAMI, ubicada en el sector de Ventanas, al Oeste del valle de Puchuncaví, fue una fuente de contaminación por más de 35 años, por lo que los sitios aledaños se encuentran altamente contaminados con metales pesados. Estos contaminantes no son biodegradables, sino que deben ser inmovilizados mediante precipitación o complejamientos específicos, o extraídos desde los suelos mediante técnicas como la fitorremediación, precipitación química, o electrodepositación, entre otras. Considerando que la técnica de menor costo es las fitorremediación, y siendo un sistema que requiere un largo tratamiento. Esta tesis se inserta en un proyecto que pretende desarrollar un sistema de remediación biológico integrado, que no sólo incluya las plantas sino que el efecto de organismos que favorezcan la instauración de las mismas. Resultan especialmente interesantes los nemátodos resistentes o tolerantes a los metales pesados, los cuales generalmente son bacterívoros. Consecuentemente, se ha planteado lograr una tríada Planta-Bacteria-Nemátodo utilizable como metodología de remediación de suelos contaminados con metales pesados, siendo idealmente una estrategia de remediación de mayor eficiencia, y más rápida que las metodologías basadas solo en la capacidad de la planta acumuladora. De lo anterior, se desprende la necesidad de lograr la multiplicación in vitro a gran escala de los nemátodos que sean aislados de suelos contaminados con metales pesados, naciendo la Hipótesis de Trabajo “Sería posible generar un proceso de cultivo masivo de nemátodos del género Rhabditido de vida libre aislados de la zona contaminada con metales pesados de Puchuncaví, a través de reactores de lecho líquido, mediante un adecuado manejo de las condiciones de operación”, y en consecuencia el Objetivo General de la Tesis “Desarrollar un proceso de propagación y cultivo en masa de nemátodos bacterívoros de vida libre, aislados desde suelos contaminados con metales pesados (zona de Puchuncaví), alimentados con enterobacterias, que permitan ser utilizados en una metodología de remediación biológica integrada”. En este contexto, la presente Tesis comprende, desde el aislamiento de nemátodos de vida libre de la zona de Puchuncaví, su caracterización biológica e implementación de unsistema de cultivo de los mismos. Los resultados indican que el nemátodo aislado en muestreos de suelo en la zona de Puchuncaví, corresponde a una especie perteneciente al género Rhabditis, lo cuales son nemátodos bacterívoros de vida libre que también pueden alimentarse de materia orgánica y no únicamente de bacterias. Esto permitió el desarrollo de un medio de cultivo sintético basado en mezcla de cereales y sales minerales y tamponantes, denominado M9C. Los estudios morfológicos y el análisis molecular de la secuencia del rDNA 18S permitieron identificar la especie como Cuticularia sp., esta especie es similar a un Cuticularia sp. no identificado presente en Genbank, pero no idéntica, por lo que posiblemente se trate de una subespecie chilena</p>
Doctor en Biotecnología
DOCTORADO EN BIOTECNOLOGIA
<p>La Fundición de ENAMI, ubicada en el sector de Ventanas, al Oeste del valle de Puchuncaví, fue una fuente de contaminación por más de 35 años, por lo que los sitios aledaños se encuentran altamente contaminados con metales pesados. Estos contaminantes no son biodegradables, sino que deben ser inmovilizados mediante precipitación o complejamientos específicos, o extraídos desde los suelos mediante técnicas como la fitorremediación, precipitación química, o electrodepositación, entre otras. Considerando que la técnica de menor costo es las fitorremediación, y siendo un sistema que requiere un largo tratamiento. Esta tesis se inserta en un proyecto que pretende desarrollar un sistema de remediación biológico integrado, que no sólo incluya las plantas sino que el efecto de organismos que favorezcan la instauración de las mismas. Resultan especialmente interesantes los nemátodos resistentes o tolerantes a los metales pesados, los cuales generalmente son bacterívoros. Consecuentemente, se ha planteado lograr una tríada Planta-Bacteria-Nemátodo utilizable como metodología de remediación de suelos contaminados con metales pesados, siendo idealmente una estrategia de remediación de mayor eficiencia, y más rápida que las metodologías basadas solo en la capacidad de la planta acumuladora. De lo anterior, se desprende la necesidad de lograr la multiplicación in vitro a gran escala de los nemátodos que sean aislados de suelos contaminados con metales pesados, naciendo la Hipótesis de Trabajo “Sería posible generar un proceso de cultivo masivo de nemátodos del género Rhabditido de vida libre aislados de la zona contaminada con metales pesados de Puchuncaví, a través de reactores de lecho líquido, mediante un adecuado manejo de las condiciones de operación”, y en consecuencia el Objetivo General de la Tesis “Desarrollar un proceso de propagación y cultivo en masa de nemátodos bacterívoros de vida libre, aislados desde suelos contaminados con metales pesados (zona de Puchuncaví), alimentados con enterobacterias, que permitan ser utilizados en una metodología de remediación biológica integrada”. En este contexto, la presente Tesis comprende, desde el aislamiento de nemátodos de vida libre de la zona de Puchuncaví, su caracterización biológica e implementación de unsistema de cultivo de los mismos. Los resultados indican que el nemátodo aislado en muestreos de suelo en la zona de Puchuncaví, corresponde a una especie perteneciente al género Rhabditis, lo cuales son nemátodos bacterívoros de vida libre que también pueden alimentarse de materia orgánica y no únicamente de bacterias. Esto permitió el desarrollo de un medio de cultivo sintético basado en mezcla de cereales y sales minerales y tamponantes, denominado M9C. Los estudios morfológicos y el análisis molecular de la secuencia del rDNA 18S permitieron identificar la especie como Cuticularia sp., esta especie es similar a un Cuticularia sp. no identificado presente en Genbank, pero no idéntica, por lo que posiblemente se trate de una subespecie chilena</p>
